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无菌封闭式集菌培养器 ZW-2008 不锈钢智能集菌仪 薄膜过滤器
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产品描述

产品属性杭州川一 发货地浙江杭州 质保质保一年,终身服务

无菌封闭式集菌培养器 ZW-2008 不锈钢智能集菌仪 薄膜过滤器

●  稀释针头和稀释液瓶过酒精灯火焰,稀释针头插到稀释液瓶
   里,开机,将稀释液倒置,把稀释液注入样品瓶中,样品瓶中稀释液加满后,放下稀释液瓶,再倒置样品瓶,使溶解后的供试品通过培养期进行集菌,(重复操作每个样品的过滤程序)
●  完成集菌后,对培养器里的抑菌成份进行冲洗,加冲洗液前,先将滤帽取下,再加入冲洗液(加至美杯体100ml),并同时振荡一次性培养器,使抑菌成份充分冲洗掉。盖上滤帽,将冲洗液滤出。
●  根据每种样品的抑菌成份的浓度,用户按照2005版《中国典》验方法来确定冲洗量。
●  冲洗完毕后,开启已好的培养基瓶,将针头插入培养基瓶中。
摘下一次性培养其顶部滤器开口的胶塞,套在一次性培养器的底口上,用软管夹子依次开闭软管,开启集菌仪,将培养基注入*的培养器内。(先取两个夹子夹住弹性软管定位处的两根管子,先加入改良马丁培养基;再取另外一个夹子夹住另外一根管子,并拔去先前的两个夹子,加入硫乙醇酸盐流体培养基)。
●  子夹闭与一次性培养器连接部的软管,留出5-6cm软管,剪除其余部分,并将开口端插在空气滤器的开口上。
●  按照药典规定的培养时间进行培养。
●   情况,若需取样分离培养,可将软管,用无菌器插入软管抽取所需量做进一步检查。
  纯净水、用水、上清水、口服液等的薄膜过滤方法
1、取滤膜(直径50mm)N张浸泡在纯化水里约5分钟
2、用镊子取出滤膜平贴在不锈钢网片上,将不锈钢网片放入不锈刚底转速:0-240转/分座里,放入垫片和O型圈,将螺盖和杯体盖紧组装成一套完整的全封闭过滤培养器。
3、,用牛皮纸将组装好的培养器包好,放入高压湿热锅里进行(按照2005年中国药典)的规定进行。
4、取好的培养器至为微生物限度检定室,进行集菌过滤。
5、打开配置好的固体培养基,将集菌好的滤膜平贴在培养基上(滤膜上不可以有气泡产生)。
6、按照中国药典的规定进行培养。
注意:
1.液层高度的控制方法:取下滤器顶部胶帽,向滤器内泵入冲洗液,冲洗液至适宜高度时,套上胶帽
2.冲洗时,若出现滤膜上无液层覆盖现象,说明滤器内气压过高,取下胶帽放气,然后套上。
3.应保持双芯针头空气过滤内的滤膜的干燥,可确保其留意畅通。
4.根据样品性状,控制集菌仪适宜转速,以进液管不出现气泡为宜。若进液管出现气泡,将低转速既可避免,否则应检查针头是否被堵塞。
5.为便于操作,推荐选用带胶塞的500ml玻璃吸湿器。
6.未尽事宜请参考《中国药典》附录“无菌法和微生物限度检查发”章节 未标题-1

基于滤膜上细菌直接计数法的细菌总数检测
【摘要】 细菌总数检测在质量监测中具有重要的意义,目前除了经典的平板培养法以外,还有微菌落法、阻抗法等检测方法,这些方法或者需要较长的检测时间,或者需要较高的检测成本。本研究提出一种不需要培养而在滤膜上直接计数的细菌总数的检测方法,它主要分为过滤、染色、显微镜计数和计算四个步骤。计算细菌总数时,根据细菌在滤膜上的分布特点,对传统公式进行改进,提出按区域计算细菌总数的计算方法,提高了检测精度。研究结果表明,该方法与传统的平板培养法无显著性差异(t=0.847,P=0.436>0.05),是一种、快速的细菌总数方法。
1 引 言
细菌总数计数的研究已有很多,目前国标规定的方法为平板计数法,该方法是将样品加入琼脂营养基,在37 ℃下培养24~48 h后计数。这种方法精度高,但耗时长,难以满足实际工作需要。为了简化检测程序、缩短检测时间,国内外学者进行了大量的检测方法的研究,提出了阻法〔1〕、Simplate TM全平器计数法〔2〕、微菌落技术〔3-5〕、纸片法〔6-7〕等检测方法,取得了的成果,但检测时间仍在4 h以上。
本研究在分析了已有研究成果的基础上,提出了在滤膜上染色后,直接计数的细菌总数检测方法,具体步骤为:用集菌仪进行细菌收集→在膜上进行染色→在油镜下计数→按公式计算出菌液浓度。实验结果表明,该方法与传统的平板培养法无显著性差异,检测时间约1 h,是一种快速的细菌总数方法。
2 材料与方法
2.1 材料
本研究中用的试验材料有集菌仪(杭州泰林生物技术设备有限公司),染色剂,生物显微镜(宁波永新光学股份有限公司),聚碳酸脂膜(直径47 mm)。
2.2 实验方法
2.2.1 准备工作 卸下集菌仪的滤网(见图1),统计滤网上小孔总数,为计算菌液浓度做准备。另外,还需对集菌仪中的集菌器进行高压,以防止过滤过程中引入外源细菌。
2.2.2 细菌收集 取浓度的霉菌菌液300~500 ml,装在集菌仪上,集菌仪采用蠕动加压方式对菌液施加的压力,使菌液流过孔径为0.45 um的聚碳酸脂膜。采用过滤方法是因为它可以使细菌相对均匀地分布在滤膜上,而选用聚碳酸脂膜是因为这种膜具有良好的透光性,便于用显微镜观察。
2.2.3 染色 集菌后取下滤膜,切下一部分放在载玻片上,进行染色、固定。染色的目的是增大细菌与背景的对比度,便于观察。
2.2.4 显微镜计数与计算 菌液经集菌仪过滤后,细菌在滤膜上的分布见图2、图3,由图可以看出细菌分布具有以下两个特点:一是细菌集中在一个个的圆形区域内,这些圆形区域和挡板的小孔相对应;二是各个圆形区域之间细菌很少。根据膜上细菌分布的这种特点,提出以圆形区域为单位进行计数,统计出圆形区域内细菌的平均个数,从而计算出菌液中细菌总数。具体步骤如下:随机选择10个圆形区域,在油镜下,调节焦距以获得较清晰的图像(见图4),统计每个圆形区域内的细菌个数,然后按公式(1)计算出菌液的浓度。
X=A10×N/V(1)图2 膜上细菌的区域分布
Fig 2 The distributing region of bacteria on the filter(100倍)
图3 膜上细菌的区域间隔
Fig 3 The space among the distributing regions(100倍)
图4 膜上细菌染色后图像
Fig 4 Figure of bacteria after coloration(1 000倍)
式中:X表示待检菌液浓度(CFU/ml)
A表示10个圆形区域内细菌总数
N表示滤网上小孔总数
V表示集菌时所用待检菌液体积(ml)
3 结果与讨论
3.1 实验结果
按上述方法计算得到的结果与平板培养法得到的结果见表1。表1 两种方法得到的细菌总数
Table 1 Total bacteria number by two different methods
样本1样本2样本3样本4样本5样本6染色镜检
(cfu/ml)5171166平板培养
(cfu/ml)8183152
对表1中两组数据进行配对t检验,在α=0.05时,双尾检验结果如下:t=0.847,P=0.436>0.05,说明两种方法得到的结果无显著性差异。


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