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产品描述
全自动定氮测定仪 CYKDN-DS 凯式定氮仪实验室
蛋白质的定量测定方法:微量凯氏定氮法
【实验目的】
学习凯氏定氮法的原理和操作技术。
微量凯氏定氮法【实验原理】
凯氏定氮法用于测定有机物的含氮量,若蛋白质的含氮量已知时,则可用此法测定样品中蛋白质的含量。
当蛋白质与共热时,其中的碳、氢两元素被氧化成二氧化碳和水,而氮则转变成,并进一步与硫酸作用生成硫酸铵。此过程通常称为“消化”。但是,这个反应进行得比较缓慢,通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高反应液的沸点,并加入作为催化剂,以促进反应的进行。
消化完成后,在凯氏定氮仪中加入浓碱,可使消化液中的硫酸铵分解,游离出,借助水蒸汽蒸馏法,将产生的蒸馏到量、浓度的硼酸溶液中,硼酸吸收后,与溶液中氢离子结合,使溶液中的氢离子浓度降低,指示剂颜色改变,然后用标准无机滴定,直至恢复溶液中原来的氢离子浓度为止。根据所用标准的量可计算出待测物中的总氮量。
蛋白质的含氮量为16%,即1克蛋白质中的氮相当于6.25克蛋白质,用凯氏定氮法测出的含氮量乘以6.25,即得样品中蛋白质的含量。
目前国内的凯式定氮仪的工作原理大同小异都是依据凯式定氮法测氮的,主要区别就是他们的自动化程度和工艺的程度了,因此凯式定氮仪动化一般是按照自动化程度分为手动定氮仪,半自动定氮仪和全自动定氮仪(也有的分为半自动定氮仪,自动定氮仪,全自动定氮仪,都是一样的)。下面来了解一下这些定氮仪定义的原因。
手动定氮仪顾名思义就是靠手动操作的,将以前的瓶瓶罐罐整合在一个仪器内,使劳动效率和工作的安全系数提高了很多,也节省了大量的劳动时间,半自动定氮仪可以自动加碱自动蒸馏自动回收液体比手动更方便了一点,也更安全了,毕竟避免了与强碱接触。全自动定氮仪可以自动加碱自动蒸馏自动回收自动滴定的,几乎一套步骤都可以自动化完成,节省了很大的劳力和时间同时也尽量避免了人为操作带来的误差,只是目前国内的全自动定氮仪大部分是不带滴定系统的,滴定的要靠手 工来做或另买滴定仪,进口的滴定系统可以选配。
这里说的定氮仪是*氮仪蒸馏器也就是定氮仪主机,实际上凯式定氮法包括消化,蒸馏,吸收与滴定这几步,在进入定氮仪蒸馏器之前还有样品的前处理过程即消化过程,这个过程通过消化炉(即消煮炉)来完成,消化炉一般根据待测样品的数量分为四孔,六孔,八孔,十二孔,十八孔,二十孔,二十四孔等多种,这里的孔就是一次可处理的样品数,即四孔就是一次可处理四个样品,这里说一下定氮仪蒸馏器是不分孔的,一般一次只能处理一个样品。样品的吸收也是在蒸馏器上进行 的,至于滴定可以手工也可以选配滴定仪,滴定仪按其不同判定终点方法有电位滴定仪,比色滴定仪和颜色判定法滴定仪等,其中颜色判定滴定仪是的,只有几家可以生产,当然价格也是高昂的。
总的来说,一套定氮仪(一般指凯式定氮仪)是由消化炉,蒸馏器(定氮仪主机),滴定仪(选配,国外有的型号整合到定氮仪主机里)这三部分组成。其中定氮仪 (主机)分为手动,半自动,全自动三类,消化炉有四孔八孔等分类,滴定仪有电位,比色,颜色等多种。使用者可以根据实验需要自行搭配。
说到农作物的含氮量或蛋白质含量的测定,人们必然会提到凯氏定氮仪装置。凯氏定氮仪装置是目前众多实验室中常配备的仪器之一,其适合实验室及检验机构中含氮量或蛋白质含量的常规检测。只是市面上流通的凯氏定氮仪装置并不少,使得实验人员也总是很发愁凯氏定氮仪装置的选择,今天我们就来讲讲凯氏定氮仪装置的种类,以及自动型凯氏定氮仪和其它凯氏定氮仪装置的区别。
据调查,市场上出现的凯氏定氮仪装置主要有三种,分别为自动化程度较高的自动型凯氏定氮仪,自动化程度有限的半自动凯氏定氮仪,以及应用时间久的凯氏定氮仪玻璃装置。其中凯氏定氮仪玻璃装置相对较脆弱,价格也较为便宜,所以,操作不够安全,检测范围也比较有限;而半自动定氮仪相对于玻璃装置的整合,稳定性高一点,可自动加部分试剂,可自动完成蒸馏,但有些试剂需要手动加,因此在操作上没有自动型凯氏定氮仪简单,也没有自动型凯氏定氮仪好用。
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