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实验准备:取硅胶管一根,将一端套在过滤装置的出液口,另一端套在收集瓶的进液口(不锈嘴);再取另一根硅胶管,一端套在收集瓶的抽气端(白色塑料嘴),另一端通过不锈钢宝塔接头与真空泵相连
(1) 试验前,应先将滤杯清洗干净、晾干、取滤膜(50mm)侵泡到纯化水里3~5min,滤杯及滤膜支撑网消毒备用(可采用火焰灭菌器消毒)。
(2)用镊子夹住滤膜放在抽滤装置的滤网上。
(3)将其供试品注入过滤杯内,然后启动真空泵,再打开相应阀门,实施过滤集菌。
(4) 供试品过滤集菌结束后(滤膜上没有水珠),关闭真空泵开关,用无菌镊子取出密封圈,在用无菌镊子取出滤膜。
(5)将滤膜贴到事先准备好的培养基上,菌面朝上,平贴,不得有气泡。相应的液体培养基注入滤杯内,培养基覆盖滤膜表面即可。
(6)盖上盖子放置在生化培养箱及恒温培养箱中,按规定温度和时间进行培养,逐日观察、计数。
(7)仪器正常性检测:取600ml~1200ml纯化水,每个滤杯注入100ml纯化水,接通真空泵电源,再分别打开相对应的阀门,实施抽滤(抽滤时间1~5min为正常范围),根据速度将准备好的纯化水加入滤杯中,纯水顺畅地从排液口流出,即视为仪器可正常工作,如果过滤速度过慢或无法过滤,请检查: A.管路连接是否漏气,滤杯密封性是否良好; B.检品是否含有较多不溶性的颗粒,悬浮物等; C.检查不锈钢网片是否堵塞,不锈钢底座出液孔是否堵塞。若属其他原因,请与厂家联系。
(8)清洗:仪器长期没有使用,再次使用前仪器管路应对管路进行消毒,可采用以下消毒剂:
A乙醇 B新洁尔灭 C甲醛 D次氯酸溶液.消毒方法:准备100ml消毒剂、200ml无菌水(不需微孔滤膜); 先将100ml消毒剂过滤,保持3~5分钟,再将200ml无菌水进行过滤,即可完成管路消毒。
(9)注意事项:
a.根据供试品性状来选择滤膜材质,过滤前后应滤膜的完整性;
b.仪器不工作时,请断电;
c.不能抽滤强酸、强碱、强氧化剂、强腐蚀等液体;
d.当供试品中含有不溶性的颗粒,悬浮物时,可能导致滤膜堵塞影响过滤,应将供试品进行预处理,除去颗粒或悬浮物;
e.抽滤前,应确保管道密封性良好.
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